Thremo賽默飛Qubit熒光計(jì)標(biāo)準(zhǔn)對照有哪些試劑？

Qubit熒光計(jì)使用特定的熒光染料，這些染料會選擇性地與不同種類的核酸或蛋白結(jié)合。因此，您必須為您想要測量的物質(zhì)選擇對應(yīng)的檢測試劑盒（Assay Kit），每個(gè)試劑盒內(nèi)都包含了預(yù)先配制好的標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）。

核心答案：Qubit的“標(biāo)準(zhǔn)對照試劑"指的就是試劑盒中自帶的兩管濃度已知的標(biāo)準(zhǔn)品溶液（Standard #1 和 Standard #2），用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。您不能混用不同試劑盒或不同檢測類型的目標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品。

一、常用的Qubit檢測試劑盒與對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品

每個(gè)Qubit檢測試劑盒通常包含：

基于熒光染料的定量工作液

標(biāo)準(zhǔn)品 #1 (濃度通常為 0 ng/mL)

標(biāo)準(zhǔn)品 #2 (濃度通常為 10 ng/μL 或 100 ng/μL，具體取決于試劑盒)

緩沖液

二、用于DNA定量

1、Qubit dsDNA HS Assay Kit (高靈敏度雙鏈DNA檢測試劑盒)

檢測范圍： 0.2 ng 至 100 ng

標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL

標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 ng/μL (即10,000 ng/mL)

適用： 適用于低濃度樣本，如下一代測序（NGS）文庫、微量DNA提取物。

2、Qubit dsDNA BR Assay Kit (寬范圍雙鏈DNA檢測試劑盒)

檢測范圍： 2 ng 至 1000 ng

標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL

標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 100 ng/μL (即100,000 ng/mL)

適用： 適用于濃度較高的樣本，如基因組DNA、PCR產(chǎn)物。

三、用于RNA定量

1、Qubit RNA HS Assay Kit (高靈敏度RNA檢測試劑盒)

檢測范圍： 5 pg 至 100 ng

標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL

標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 ng/μL

適用： 總RNA、小RNA（如miRNA）的準(zhǔn)確定量。

2、Qubit RNA BR Assay Kit (寬范圍RNA檢測試劑盒)

檢測范圍： 20 ng 至 1000 ng

標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 ng/mL

標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 100 ng/μL

四、用于蛋白定量

1、Qubit Protein Assay Kit (蛋白質(zhì)檢測試劑盒)

檢測范圍： 0.06 μg 至 5 μg

標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 μg/mL

標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 μg/μL (即10,000 μg/mL)

2、Qubit Protein BR Assay Kit (寬范圍蛋白質(zhì)檢測試劑盒)

檢測范圍： 1 μg 至 50 μg

標(biāo)準(zhǔn)品 #1: 0 μg/mL

標(biāo)準(zhǔn)品 #2: 10 μg/μL

五、使用標(biāo)準(zhǔn)品的操作流程（以dsDNA HS為例）

1、準(zhǔn)備工作液： 將熒光染料與緩沖液按一定比例混合。

2、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線：

取兩支Qubit專用試管，分別加入199 μL的工作液。

在第一管中加入 1 μL 的 Standard #1 (0 ng/μL)。

在第二管中加入 1 μL 的 Standard #2 (10 ng/μL)。 混合均勻。

這兩管就是您的標(biāo)準(zhǔn)對照。

3、測量樣品： 用同樣的方法，將1 μL您的未知樣本與199 μL工作液混合。

4、上機(jī)讀數(shù)：

在Qubit熒光計(jì)上選擇對應(yīng)的檢測程序（如dsDNA HS）。

儀器會首先提示測量兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品。完成后，儀器會自動(dòng)生成一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。

隨后再測量您的樣品管，儀器會根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本的準(zhǔn)確濃度。