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Qubit 4.0熒光計在檢測核酸（DNA/RNA）濃度時，通常比傳統(tǒng)的紫外吸收法（如NanoDrop）更靈敏、更特異，尤其在低濃度樣本或復雜樣品中優(yōu)勢明顯。以下是具體對比：
一、靈敏度對比
1、Qubit 4.0
檢測下限 ：DNA/RNA：低至 0.5 pg/μL（高靈敏度）
線性范圍 ：較窄（適合精準定量低濃度樣本）
樣本體積 ：僅需 1-20 μL
2、紫外吸收法（NanoDrop等）
檢測下限 ：通常 2-5 ng/μL（依賴樣品純度）
線性范圍 ：較寬（可測高濃度樣本，但低端不準）
樣本體積 ：需 1-2 μL（但易受污染物干擾）
二、特異性對比
1、Qubit 4.0：
基于熒光染料（如dsDNA BR Assay），特異性結(jié)合目標分子（如雙鏈DNA、單鏈DNA或RNA），幾乎不受游離核苷酸、蛋白質(zhì)、鹽類等干擾。
適合：痕量樣本（如單細胞測序、cfDNA）、污染物多的樣本（如粗提物）。
2、紫外吸收法：
通過A260吸光度計算濃度，但會受雜質(zhì)干擾（如蛋白質(zhì)A280、酚類A270、胍鹽等），導致假性偏高。
適合：快速估算高純度樣本（如柱提后的DNA/RNA）。
三、適用場景
1、優(yōu)先選擇Qubit 4.0：
需要高精度（如NGS文庫定量）。
樣本濃度極低（如環(huán)境DNA、微量提取物）。
樣本含污染物（如胍鹽、酚、蛋白質(zhì)）。
2、紫外吸收法的優(yōu)勢：
快速檢測（無需染料孵育）。
可同時評估純度（A260/A280、A260/A230比值）。
四、注意事項
1、Qubit的局限性：
需使用特定熒光染料（成本較高）。
每次檢測需標準品校準。
無法區(qū)分DNA和RNA（除非使用RNA特異性染料）。
2、紫外吸收法的風險：
污染物可能導致濃度虛高（如鹽離子也會吸收260 nm光）。
五、總結(jié)
1、靈敏度：Qubit 4.0顯著優(yōu)于紫外法，尤其對低濃度樣本（＜10 ng/μL）。
2、準確性：Qubit受干擾更少，結(jié)果更可靠。
3、效率：紫外法更快，適合初步篩查。
