thermo賽默飛QubitFlex熒光計(jì)操作具體步驟

賽默飛Qubit Flex熒光計(jì)是一款用于DNA、RNA和蛋白質(zhì)定量分析的高通量熒光檢測(cè)儀器，可同時(shí)測(cè)量多達(dá)8個(gè)樣本。以下是其操作使用指南：

一、Qubit Flex熒光計(jì)特點(diǎn)

1、高通量檢測(cè)：Qubit Flex可同時(shí)檢測(cè)8個(gè)樣本，相比單樣本檢測(cè)的Qubit 4，可節(jié)省50%的時(shí)間。

2、高靈敏度和特異性：采用熒光染料法，僅結(jié)合目標(biāo)分子（如dsDNA、RNA、蛋白質(zhì)）時(shí)才會(huì)發(fā)出信號(hào)，減少雜質(zhì)干擾。

3、內(nèi)置計(jì)算器：包括試劑計(jì)算器、檢測(cè)范圍計(jì)算器、摩爾濃度計(jì)算器和歸一化計(jì)算器，幫助優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程。

4、數(shù)據(jù)管理：可存儲(chǔ)10,000個(gè)樣本數(shù)據(jù)，支持通過(guò)Wi-Fi、USB或以太網(wǎng)導(dǎo)出數(shù)據(jù)。

二、Qubit Flex熒光計(jì)操作流程

1、加載樣本：

使用Qubit Flex八聯(lián)管條（200 μL薄壁聚丙烯管）。

每個(gè)樣本需1–20 μL，檢測(cè)限可達(dá)10 pg/μL DNA或12.5 μg/mL蛋白質(zhì)。

2、校準(zhǔn)：

可選擇運(yùn)行新校準(zhǔn)或使用上次保存的校準(zhǔn)數(shù)據(jù)。

校準(zhǔn)可在檢測(cè)管區(qū)域進(jìn)行，無(wú)需單獨(dú)校準(zhǔn)8個(gè)管子（需固件版本≥1.5.0）。

3、檢測(cè)：

檢測(cè)時(shí)間約3秒/樣本。

蛋白質(zhì)樣品需孵育15分鐘，核酸樣品孵育2分鐘后讀數(shù)。

4、數(shù)據(jù)分析

結(jié)果可顯示為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)或列表形式，支持圖表導(dǎo)出。

可通過(guò)Wi-Fi上傳至Thermo Fisher Connect云平臺(tái)，或通過(guò)USB/以太網(wǎng)傳輸至計(jì)算機(jī)。

三、注意事項(xiàng)

1、讀數(shù)穩(wěn)定性：避免反復(fù)讀取同一管，因加熱可能導(dǎo)致信號(hào)降低。如需重復(fù)測(cè)量，取出管子冷卻30秒后再測(cè)。

2、去垢劑影響：Qubit Protein Assay可耐受少量去垢劑（≤5%），具體參考試劑盒手冊(cè)。

3、與NanoDrop對(duì)比：Qubit讀數(shù)通常低于紫外吸收法（如NanoDrop），因其僅檢測(cè)目標(biāo)分子，而非總核酸。

四、維護(hù)與支持

1、光源壽命：LED光源預(yù)計(jì)可使用5年。

2、固件升級(jí)：如需21 CFR Part 11合規(guī)支持，需升級(jí)至SAE模式（固件≥1.7.0）。

3、系統(tǒng)驗(yàn)證：可使用Qubit Flex系統(tǒng)驗(yàn)證檢測(cè)試劑盒定期檢查儀器性能。